打麻将游戏下载
歡迎光臨源葉生物,登錄 | 注冊 |
當前位置: 首頁 > 新聞中心 > 膽堿在乳品中的應用和測定
膽堿在乳品中的應用和測定
朱云飛 / 2019-06-20

1關鍵詞:膽堿、膽堿氧化酶、過氧化物酶、磷脂酶D
一、膽堿
膽堿是一種強有機堿,是卵磷脂的組成成分,也存在于神經鞘磷脂之中,是機體可變甲基的一個來源而作用于合成甲基的產物,同時又是乙酰膽堿的前體。
膽堿對人體的作用相當廣泛,如促進腦發育和提高記憶能力、調控細胞凋亡、促進脂肪代謝、促進體內甲基代謝、降低血清膽固醇等。因此,在乳品中添加膽堿越來越受到重視,世界許多國家,包括中國在內,均已將膽堿批準作為營養食品添加劑。
國標GB5413.20-2013嬰幼兒食品和乳品中膽堿的測定中規定了兩種方法,酶比色法和雷氏鹽分光光度法。鑒于目前傳統的檢測方法(雷氏鹽比色法)不同程度的存在操作繁瑣、選擇性差、干擾因素多等缺陷,一般大型企業都會選擇酶比色法。
二、膽堿的含量測定方法(酶比色法)
1、原理:膽堿經酸水解后邊成游離態的膽堿,再經酶氧化后與顯色劑反應生成有色物質,其顏色的深淺在一定濃度范圍內與膽堿含量成正比。
2、試劑
鹽酸(1mol/L):量取85ml的濃鹽酸加水稀釋至1000ml;
鹽酸(3mol/L):量取125ml的濃鹽酸加水稀釋至1000ml;
氫氧化鈉溶液(500g/L):稱取500g氫氧化鈉,溶于水并稀釋至1000ml;
Tris緩沖溶液(0.05mol/L,PH=8.0±0.2):稱取6.057g三羥基氨基甲烷溶于500ml蒸餾水中,用1mol/L鹽酸調PH至8.0±0.2,用蒸餾水定容至1000ml。此溶液在4℃冰箱可保存一個月;
酶反應顯色劑:取100-120活力單位的膽堿氧化酶、250-280活力單位的過氧化物酶、75-100活力單位的磷脂酶D、15mg 4-氨基安替比林和50ml苯酚置于100ml的容量瓶中,用0.05mol/L Tris緩沖液稀釋至刻度。(現用現配)
膽堿氫氧化物標準品:稱取102±2℃烘至恒重的膽堿酒石酸氫鹽523mg置于100ml容量瓶中,用蒸餾水稀釋至刻度即為儲備液(冰箱冷藏不超過1周);吸取儲備液10.0ml溶液與100ml容量瓶中,用水稀釋至刻度即為工作液(現用現配)。
3、簡易步驟
3.1樣品制備:稱取5g混合均勻的固體樣品(液體20g),于100ml錐形瓶中,加入30ml1mol/L鹽酸溶液(液體樣品10ml 3mol/L鹽酸溶液);70℃水浴,水解3小時(每隔半小時搖勻一次),冷卻,用氫氧化鈉溶液調PH為3.5-4.0,轉入50ml容量瓶中用蒸餾水定容;過濾水解液,濾液應是澄清,否則再慮,濾液放冰箱冷藏可保存3天。
3.2標曲制作:分別吸取2ml、4ml、6ml、8ml膽堿標準工作液于10ml容量瓶中,用蒸餾水稀釋至刻度;準備6支試管,一個做空白加入0.1ml蒸餾水,另5支分別加入0.1ml標準溶液和4個稀釋梯度,再每個試管加入3ml酶反應顯色劑;用密封保護膜蓋住試管,混勻,把試管置于37℃水浴中保溫反應15min;時間到后將溶液取出冷卻至室溫,再波長505nm處,用蒸餾水做空白,測定吸光值制作標準曲線。
3.3樣品測定:將每個樣品準備2支試管,分別加入0.1ml樣品濾液,一個加入蒸餾水3ml做空白,一個加入3ml酶反應顯色劑;用密封保護膜蓋住試管,混勻,把試管置于37℃水浴中保溫反應15min;時間到后將溶液取出冷卻至室溫,再波長505nm處,用蒸餾水做空白,測定吸光值,然后計算樣品中膽堿的含量。
三、酶比色法中源葉能為您提供的試劑
1、膽堿氧化酶:CAS號 9028-67-5  源葉貨號S31014
2、過氧化物酶:CAS號 9003-99-0
源葉貨號S10061、S10062、S10063、S10064(不同純度的)
3、磷脂酶D : CAS號 9001-87-0 源葉貨號 S25117、S31760
4、4-氨基安替比林: CAS號 83-07-8 源葉貨號 B34212

下一篇:關于低聚木糖
上一篇:2019年度促銷返點開始了!!!
打麻将游戏下载 北京pk10历史开奖记录 拖胆中奖规则 赌场里的限红 破解重庆时时彩 欧泊彩票是什么软件 百人牛牛官网下载 五步倍投止损 全民炸金花下载手机版 旭彩注册 时时彩官方开奖视频下载